Ключові слова
мутації гена RET
секвенування наступного покоління
Як цитувати
Анотація
Резюме. Медулярна карцинома щитоподібної залози (МТС) виникає з неепітеліальних парафолікулярних клітин (С-клітин). МТС може бути спадковою (25%) або спорадичною (75%). Активуючі зародкові мутації RET виявляють у 95–98% спадкових MTC, тоді як соматичні мутації RET присутні в 25–40% спорадичних MTC.
Мета. Метою дослідження було визначення мутацій гена RET у кодонах 634 і 918, які асоціюються з найвищим ризиком MTC.
Матеріали та методи. Цільну кров отримували стандартною венепункцією. Геномну ДНК виділяли за допомогою набору EliGene® Blood DNA Isolation kit. Ампліфікацію ДНК проводили методом ПЛР з використанням праймерів, специфічних для ділянок екзонів 10, 11 і 16 гена RET, які можуть містити мутації. Секвенування наступного покоління для геномних ДНК кожного зразка було виконано за допомогою Ion Ampliseq Cancer Hotspot Panel v2 згідно з інструкціями виробника.
Результати. Серед усіх досліджених зразків лише зразок № 2 має гетерозиготну мутацію p.M918T. У результаті секвенування геномної ДНК 7 пацієнтів із діагнозом MTC у чотирьох пацієнтів було виявлено чотири різні патогенні спадкові мутації гена RET.
Висновки. Визначення мутацій у гені RET є перспективним підходом для встановлення діагнозу при лікуванні спадкових форм МТС і дозволяє планувати подальші напрямки терапії. Метод PCR-RFRP (polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism) дозволяє виявити окремі мутації в гені RET та інших генах, пов’язаних із найвищим ризиком МТС (M918T, C634F і A883F). Враховуючи популяційні частоти різних патогенних варіантів гена RET в Україні, метод PCR-RFRP може стати ефективним інструментом скринінгу. Секвенування наступного покоління дозволяє проаналізувати всю послідовність гена RET та інших генів і виявити набагато більший спектр варіантів, включаючи раніше неописані.
Посилання
Ciampi R, Romei C, Cosci B, Vivaldi A, Bottici V, Renzini G, et al. Chromosome 10 and RET gene copy number alterations in hereditary and sporadic Medullary Thyroid Carcinoma. Mol. Cell. Endocrinol. 2012;348:176-182.
Ciampi R, Romei C, Ramone T, Prete A, Tacito A, Cappagli V, et al. Genetic Landscape of Somatic Mutations in a Large Cohort of Sporadic Medullary Thyroid Carcinomas Studied by Next-Generation Targeted Sequencing. iScience. 2019 Oct 25;20:324-336. doi: 10.1016/j.isci.2019.09.030.
Dabelić N, Jukić T, Fröbe A. Medullary Thyroid Cancer – Feature Review and Update on Systemic Treatment. Acta Clin Croat. 2020 Jun;59(Suppl 1):50-59. doi: 10.20471/acc.2020.59.s1.06.
Barletta JA, Nosé V, Sadow PM. Genomics and Epigenomics of Medullary Thyroid Carcinoma: From Sporadic Disease to Familial Manifestations. Endocr Pathol. 2021 Mar;32(1):35-43. doi: 10.1007/s12022-021-09664-3. Epub 2021 Jan 25.
Pieterman CRC, Valk GD. Update on the clinical management of multiple endocrine neoplasia type 1. Clin Endocrinol (Oxf). 2022 Oct;97(4):409-23. doi: 10.1111/cen.14727.
Тронько МД, Гуда ББ. Орфанні ендокринні захворювання: сучасні тенденції хірургічного лікування в Україні. Ендокринологія. 2022;27(4):287-301 (Tronko, B.B. Guda M.D. Orphan endocrine diseases: сurrent trends and the state of their surgical treatment in Ukraine. Endokrynolohiya. 2022;27(4):287-301). Ukrainian. doi: 10.31793/1680-1466.2022.27-4.287.
Romei C, Pardi E, Cetani F, Elisei R. Genetic and clinical features of multiple endocrine neoplasia types 1 and 2. J Oncol. 2012;2012:705036. doi: 10.1155/2012/705036.
Angelousi A, Hayes AR, Chatzellis E, Kaltsas GA, Grossman AB. Metastatic medullary thyroid carcinoma: a new way forward. Endocr Relat Cancer. 2022 May 31;29(7):R85-R103. doi: 10.1530/ERC-21-0368.
Zhang Y, Zheng WH, Zhou SH, Gu JL, Yu Q, Zhu YZ, et al. Molecular genetics, therapeutics and RET inhibitor resistance for medullary thyroid carcinoma and future perspectives. Cell Commun Signal. 2024 Sep 28;22(1):460. doi: 10.1186/s12964-024-01837-x.
Ebrahimi P, Payab M, Shariati A, Alipour N, Nozheh A, Tavangar SM, et al. Unusual Presentation of Metastatic Medullary Thyroid Cancer Involving Bone Marrow, Kidneys, and Adrenal Gland: A Literature Review Based on a Case Report. Cancer Rep (Hoboken). 2024 Oct;7(10):e70022. doi: 10.1002/cnr2.70022.
Watanabe T, Nanamiya H, Kojima M, Nomura S, Furukawa S, Soeda S, et al. Clinical implication of oncogenic somatic mutations in early-stage cervical cancer with radical hysterectomy. Sci Rep. 2020 Oct 30;10(1):18734. doi: 10.1038/s41598-020-72518-1.
Roy S, Coldren C, Karunamurthy A, Kip NS, Klee EW, Lincoln SE, et al. Standards and Guidelines for Validating Next-Generation Sequencing Bioinformatics Pipelines: A Joint Recommendation of the Association for Molecular Pathology and the College of American Pathologists. J Mol Diagn. 2018 Jan;20(1):4-27. doi: 10.1016/j.jmoldx.2017.11.003.
Mucha L, Leidig-Bruckner G, Frank-Raue K, Bruckner T, Kroiss M, Raue F. German study group for rare thyroid cancer. Phaeochromocytoma in multiple endocrine neoplasia type 2: RET codon-specific penetrance and changes in management during the last four decades. Clin Endocrinol (Oxf). 2017 Oct;87(4):320-326. doi: 10.1111/cen.13386.
Elisei R, Tacito A, Ramone T, Ciampi R, Bottici V, Cappagli V, et al. Twenty-Five Years Experience on RET Genetic Screening on Hereditary MTC: An Update on The Prevalence of Germline RET Mutations. Genes (Basel). 2019 Sep 10;10(9):698. doi: 10.3390/ genes10090698.
Wells SA Jr, Asa SL, Dralle H, Elisei R, Evans DB, Gagel RF, et al. Revised American Thyroid Association guidelines for the management of medullary thyroid carcinoma. Thyroid. 2015 Jun;25(6):567-610. doi: 10.1089/thy.2014.0335